二氧化碳培養(yǎng)箱:細(xì)胞,組織培養(yǎng)和微生物測(cè)試的主要部分

二氧化碳培養(yǎng)箱是從事細(xì)胞或組織培養(yǎng)的傳統(tǒng)生物實(shí)驗(yàn)室的支柱。孵育器提供了設(shè)計(jì)成模擬細(xì)胞的天然環(huán)境的穩(wěn)定環(huán)境:pH 7.2-7.5,溫度37℃,相對(duì)濕度約95%??刂萍s5%的CO 2 濃度以匹配生理?xiàng)l件并維持恒定的pH。

在需要維持,擴(kuò)增或培養(yǎng)細(xì)胞的幾個(gè)小時(shí)到許多周期的任何地方使用孵育器。常見(jiàn)的應(yīng)用包括用于細(xì)胞庫(kù),病毒學(xué),微生物測(cè)試(環(huán)境和醫(yī)學(xué)/診斷),小規(guī)模生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物(蛋白質(zhì),基因,毒素,病毒),體外受精和藥物測(cè)試的制造細(xì)胞的擴(kuò)展。非常大體積的應(yīng)用如臨床微生物學(xué)通常使用大的覆蓋培養(yǎng)箱。

Sanyo(Wood Dale,IL)戰(zhàn)略發(fā)展和營(yíng)銷(xiāo)經(jīng)理Deepak M. Mistry指出,生物治療和干細(xì)胞研究的上升為高性能二氧化碳培養(yǎng)箱帶來(lái)了額外的需求。“屬于藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)的應(yīng)用程序,采用高度監(jiān)管的協(xié)議,廣泛使用培養(yǎng)箱。

驗(yàn)證培養(yǎng)箱操作和清潔受管制工作的需要是對(duì)培養(yǎng)箱內(nèi)部條件的嚴(yán)格控制背后的驅(qū)動(dòng)力。當(dāng)有人打開(kāi)門(mén)來(lái)引入或取出樣品時(shí),培養(yǎng)箱內(nèi)的條件快速變化。在一些情況下,細(xì)胞的健康或活力可能受損。Mistry告訴實(shí)驗(yàn)室經(jīng)理,“與培養(yǎng)箱一樣,條件的一致性是培養(yǎng)箱的一個(gè)問(wèn)題。三洋和其他公司使用紅外傳感器,自動(dòng)測(cè)量CO 2濃度并啟動(dòng)氣體濃度的重新平衡。

保持清潔

保持培養(yǎng)箱內(nèi)的清潔是**重要的,特別是對(duì)于同時(shí)容納幾個(gè)細(xì)胞系或快速改變樣品的單元。畢竟,培養(yǎng)箱不僅為感興趣的細(xì)胞提供理想的生長(zhǎng)條件,而且為侵入性真菌,酵母和細(xì)菌提供理想的生長(zhǎng)條件。

傳統(tǒng)上,通過(guò)熱或紫外(UV)光實(shí)現(xiàn)消毒。熱是有效的,但是是能量密集的并且施加材料的應(yīng)力。紫外線(xiàn)也能很好地工作,但只在視線(xiàn)上:沒(méi)有直接照射的角落和裂隙可能仍然受到污染。

三洋已經(jīng)率先使用過(guò)氧化氫氣體進(jìn)行培養(yǎng)箱消毒。氣體滲透箱內(nèi)的每個(gè)表面區(qū)域并提供接近100%的病原體殺滅。該公司聲稱(chēng),在去除細(xì)胞,清潔和引入新細(xì)胞之間的循環(huán)時(shí)間在過(guò)氧化物消毒后大約兩小時(shí)。

幾家供應(yīng)商制造過(guò)氧化物滅菌設(shè)備,這些設(shè)備在細(xì)胞培養(yǎng),藥物和食品安全工作中正在進(jìn)行。Mistry提到兩個(gè):Steris(Mentor,OH)和Bioquell(Hampshire,UK)。

保持研究或生物制造中使用的培養(yǎng)細(xì)胞的健康是**關(guān)重要的 - 不僅是在培養(yǎng)箱中,而且在使用和儲(chǔ)存期間。“由于細(xì)胞系可能需要幾周或幾個(gè)月的時(shí)間,它們非常昂貴,”Mistry說(shuō)。“用戶(hù)希望他們離開(kāi)培養(yǎng)箱后可以活幾個(gè)月。

大衛(wèi)·克雷格,在產(chǎn)品經(jīng)理粘結(jié)劑(波希米亞,紐約州),看到了三氣培養(yǎng)箱,這是傳統(tǒng)的二氧化碳的需求不斷增加2結(jié)合了氧氣控制設(shè)備。氧氣通常在15體積%和20體積%之間; 這里O 2低**0.2%。

術(shù)語(yǔ)“三氣體”是指用于CO 2,氮?dú)夂脱鯕獾膯为?dú)的連接。“低水平是通過(guò)注入氮?dú)怛?qū)出氧氣實(shí)現(xiàn)的,”Craig說(shuō)。

三氣體單元在處理在特定大氣條件下蓬勃生長(zhǎng)的組織的生物學(xué)和腫瘤學(xué)實(shí)驗(yàn)室中是流行的。例如,它們用于在較低氧濃度下在低氧和干細(xì)胞下生長(zhǎng)的癌細(xì)胞。組織再生研究的爆炸是培養(yǎng)箱制造商的福音。“這個(gè)想法是復(fù)制生理生長(zhǎng)條件。

很多熱空氣

BINDER專(zhuān)門(mén)從事熱空氣滅菌,發(fā)生在180°C。根據(jù)Craig,滅菌提供**強(qiáng)大和可靠的清潔。“下一個(gè)**接近的,在140度去污,不會(huì)刪除一切,而消毒在90度只是敲落一些生物。你需要**少170度,以消除不僅僅是微生物和細(xì)胞,而是DNA。

熱空氣滅菌實(shí)際上消除了冷凝 - 微生物的繁殖地,并且不需要使用HEPA過(guò)濾。HEPA單元是昂貴的,并且是另一種潛在的污染源。

也許**有吸引力的滅菌的特點(diǎn)是,它發(fā)生無(wú)需用戶(hù)干預(yù)。“你完成一個(gè)實(shí)驗(yàn),按一個(gè)按鈕,第二天早上你準(zhǔn)備好了,”克雷格說(shuō)。滅菌周期僅需10小時(shí)。清潔培養(yǎng)箱通常包括拆卸,高壓滅菌部件和手洗。

“重要的是要記住,CO2培養(yǎng)箱不只是生長(zhǎng)你想要的東西; 他們也成長(zhǎng)你不想要的東西,“Craig說(shuō)。