避免污染
哺乳動物細胞是在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的，溫度有利于幾乎任何微生物的生長，無論是想要的還是不需要的。盡管許多研究人員在他們的培養(yǎng)基中使用抗生素和抗真菌劑作為預(yù)防污染的措施，但這并不能解決持續(xù)的方法學(xué)錯誤，并常常隱藏了存在問題的事實。如果可能的話，避免使用這些制劑，并努力改進您的無菌技術(shù)并開發(fā)一個系統(tǒng)來保持您的培養(yǎng)箱清潔。
培養(yǎng)箱污染的主要來源是微生物通過檢測門進入。這可能是顯而易見的，但將它放在shou要位置將有助于您發(fā)展防止全面污染的長期習(xí)慣。在培養(yǎng)箱中放置物品時應(yīng)戴手套，并盡量減少內(nèi)部玻璃門打開的時間。偶爾用70％乙醇擦拭門把手。每周更換一次，保持濕度盤中的水清潔。定期用肥皂和水擦洗鍋，然后用乙醇擦拭; 或者，高壓滅菌鍋。如果培養(yǎng)基溢出培養(yǎng)箱內(nèi)，請取出擱板并徹底清潔。
這些清潔儀式的頻率將取決于您培養(yǎng)箱獲得的流量。大型實驗室中的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的清潔。如果你從一個干凈的培養(yǎng)箱開始，并且注意進出的東西，它應(yīng)該保持清潔數(shù)周或數(shù)月。
確保二氧化碳水平是應(yīng)該的
大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。二氧化碳是這個緩沖系統(tǒng)的重要組成部分，必須保持在5％以維持介質(zhì)在生理pH值。雖然基本上所有的現(xiàn)代化培養(yǎng)箱都配備了CO2傳感器以保持所需的CO2水平，但隨著時間的推移，校準可能會偏離設(shè)定值，需要操作員直接確定CO2水平時進行偏置重新校準。
測量培養(yǎng)箱中CO2水平的**簡單和**準確的方法是使用氣體分析儀，氣體分析儀的操作基于待測氣體的化學(xué)吸收之后的流體的體積膨脹。該設(shè)備使用室內(nèi)空氣（0.04％CO2）“歸零”，培養(yǎng)箱中的空氣通過門或孵化器側(cè)的端口進行采樣。
較舊的模型培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的重新校準。**好的新型號每個月執(zhí)行一次CO2傳感器的自動重新清零。雖然這些模型很少需要手動重新校準，但用戶仍應(yīng)按照其標(biāo)準操作程序的規(guī)定，檢查腔室二氧化碳水平。
保持37°C的溫度
在我們的身體努力保持核心溫度37°C的情況下，在這種溫度下培養(yǎng)的哺乳動物細胞是**幸福的，這并不奇怪。大多數(shù)
二氧化碳培養(yǎng)箱都配備了顯示內(nèi)腔溫度的顯示屏，但定期仔細檢查一下是個不錯的主意，特別是當(dāng)您注意到細胞生長不理想或不常見時。這是用高質(zhì)量的校準溫度計**好的。打開外部和內(nèi)部的培養(yǎng)箱門，并將溫度計帶到玻璃門的內(nèi)部，以便在玻璃門關(guān)閉時從外部讀取溫度。在你離開實驗室前**做這件事。第二天早上，打開培養(yǎng)箱的外門并讀取溫度計。再一次，如果讀數(shù)不同于37°C（并且溫度計準確），則需要重新校準板載溫度傳感器。
保持潮濕
您的培養(yǎng)箱內(nèi)部保持在相對較高的溫度下，因此培養(yǎng)基的蒸發(fā)在沒有高濕度的情況下會成為一個真正的問題。通過將水保持在培養(yǎng)箱底部的托盤中，保持培養(yǎng)箱內(nèi)相對濕度較高（90％**95％）。其缺點是充水盤是潛在的污染源。
